О введении в действие МУ МЗ ПМР 4.2.2942-14 «Методы санитарно-бактериологических исследований объектов окружающей среды, воздуха и контроля стерильности в лечебных организациях»
Приказ
№ 394 от 21.08.2014
САЗ 14-38
- 1. Ввести в действие на территории Приднестровской Молдавской Республики методические указания МУ МЗ ПМР 4.2.2942-14 «Методы санитарно-бактериологических исследований объектов окружающей среды, воздуха и контроля стерильности в лечебных организациях» (Приложение к настоящему Приказу).
- 2. Контроль за исполнением настоящего Приказа возложить на временно исполняющего обязанности главного врача ГУ «Республиканский центр гигиены и эпидемиологии» Раду И.А.
- 3. Настоящий Приказ вступает в силу со дня официального опубликования.
- Раздел 1. Область применения
- 1. Настоящие методические указания (далее - МУ) разработаны в соответствии с Законом Приднестровской Молдавской Республики от 3 июня 2008 года № 481-З-IV «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения» (САЗ 08-22) с изменением и дополнениями, внесенными Законом Приднестровской Молдавской Республики от 6 августа 2009 года № 838-ЗИД-IV (САЗ 09-32).
- 2. Настоящие МУ предназначены для специалистов органов и организаций Государственной санитарно-эпидемиологической службы Приднестровской Молдавской Республики, а также организаций здравоохранения, других организаций лечебного профиля, независимо от их организационно-правовых форм и форм собственности.
- 3. Настоящие МУ устанавливают методы санитарно-бактериологических исследований в организациях здравоохранения, других организациях лечебного профиля.
- 4. Объектами санитарно-бактериологических исследований, на которые распространяются настоящие МУ, являются:
- 5. Номенклатура, кратность и объем санитарно-бактериологических исследований устанавливается действующими нормативными правовыми актами Приднестровской Молдавской Республики с учетом санитарно-эпидемиологической обстановки.
- 6. Для санитарно-бактериологических исследований объектов окружающей среды, воздуха и контроля стерильности в организациях здравоохранения и других организациях лечебного профиля могут быть использованы питательные среды лабораторного приготовления и коммерческие, расходные материалы, биологические препараты, указанные в настоящих МУ. Применение других питательных сред, расходных материалов, биологических препаратов допускается при наличии методик исследования, утвержденных и разрешенных к применению на территории Приднестровской Молдавской Республики.
- Раздел 2. Методы санитарно-бактериологических исследований
- Глава 1. Исследования бактериальной обсемененности воздушной среды
- 7. Исследования бактериальной обсемененности воздушной среды проводят в помещениях лечебных организаций в зависимости от их функционального назначения на санитарно-микробиологические показатели:
- 8. Пробы воздуха отбирают аспирационным методом с помощью аппаратов и устройств, разрешенных к применению на территории Приднестровской Молдавской Республики.
- 9. Количество пропущенного воздуха должно составлять 100 дм3 для определения общего количества микроорганизмов, дрожжевых и плесневых грибов и 250 дм3 для определения S. aureus. Исследование воздуха седиментационным методом не допускается.
- 10. Для определения общего количества микроорганизмов в 1 м3 воздуха забор проб проводят на питательный агар типа: мясопептонный агар (далее - МПА), ГРМ - агар и другие, приготовленные согласно инструкциям по их применению. Посевы инкубируют при температуре 37°С в течение 48±2 часа, подсчитывают количество выросших колоний и производят перерасчет на 1 м3 воздуха. При наличии роста колоний дрожжевых и плесневых грибов, их подсчитывают и делают пересчет на 1 м3 воздуха. В протоколе количество дрожжевых и плесневых грибов указывают отдельно.
- 11. При переносе аппаратов и устройств для отбора проб воздуха из одного помещения в другое их поверхность обрабатывают дезинфицирующим раствором. Столик, внутренние стыки, крышку и прочие части прибора с внутренней и внешней стороны протирают 70 %-ным спиртом.
- 12. Схема бактериологического исследования на стафилококк:
- Глава 2. Исследования микробной обсемененности объектов внешней среды
- 13. Бактериологическое исследование микробной обсемененности объектов внешней среды предусматривает определение стафилококков, бактерий группы кишечных палочек, сальмонелл, синегнойной палочки. Отбор проб с поверхностей различных объектов осуществляют методом смывов. По эпидемиологическим показаниям номенклатура исследований микробной обсемененности объектов внешней среды может быть расширена.
- 14. Взятие смывов производят стерильными ватными тампонами, вмонтированными в пробирки. Для увлажнения тампонов в пробирки наливают по 2,0 см3 стерильной 0,1% пептонной воды с добавлением нейтрализаторов дезинфицирующих средств.
- 15. При контроле мелких предметов смывы забирают с поверхности всего предмета. При контроле предметов с большой поверхностью смывы проводят в нескольких местах исследуемого предмета общей площадью примерно 100 см2.
- 16. Для обнаружения стафилококков делают высев 0,2-0,3 см3 смывной жидкости в пробирку с 5,0 см3 6,5 % -ного солевого бульона. Засеянные пробирки инкубируют при температуре 37°С в течение 24±2 часа, после чего делают высев на желточно-солевые среды на основе сред: элективно-солевой агар, стафилококкагар, маннитолагар или среда № 10. Дальнейшие исследования выделенных культур стафилококков проводят согласно пункту 12 настоящих МУ.
- 17. Для обнаружения бактерий группы кишечных палочек делают высев 0,2-0,3 см3 смывной жидкости в пробирку с 5,0 см3 среды Кесслера. Засеянные пробирки инкубируют при температуре 37 °С в течение 24±2 часа и делают пересев на среду Эндо. Выросшие колонии на среде Эндо подвергают дальнейшему изучению, для установления их возможной принадлежности к патогенным энтеробактериям.
- 18. Для обнаружения сальмонелл делают высев 0,2-0,3 см3 смывной жидкости в пробирку с 5,0 см3 одной из сред обогащения (магниевая, селенитовая). Засеянные пробирки инкубируют при температуре 37°С в течение 18±2 часа, затем делают пересев на среду Эндо и висмут-сульфит агар с последующим отбором подозрительных колоний и их идентификацией.
- 19. Для обнаружения синегнойной палочки делают высев на среду № 8 (бульон для накопления стафилококков и синегнойной палочки) и среду № 9 (для определения синегнойной палочки по наличию пигмента пиоцианина). Колонии, подозрительные на синегнойную палочку (колонии с ровными или слегка волнистыми краями, гладкой блестящей поверхностью с характерным запахом и пигментом, однако, следует учесть, что запах и пигмент могут сильно варьировать или вообще отсутствовать), пересевают на скошенный агар.
- 20. Перечень объектов, подлежащих санитарно-бактериологическому контролю методом смывов:
- Глава 3. Правила отбора проб для контроля стерильности в лечебно-профилактических организациях
- 21. Отбор проб на стерильность производит специалист после прохождения инструктажа по технике выполнения отбора проб для микробиологического анализа.
- 22. Все изделия, подлежащие контролю, направляют в микробиологическую лабораторию в упаковке, в которой осуществляли их стерилизацию.
- 23. Для контроля стерильности используют следующие питательные среды: тиогликолевую, бульон Сабуро (с ингибитором посторонней микрофлоры - теллурит калия или левомицетин).
- 24. Посевы в тиогликолевой среде выдерживают в термостате при температуре 32°С. Посевы в бульоне Сабуро - при температуре от 20°С до 22°С в течение 14 суток при контроле изделий, простерилизованных растворами химических средств и газовым методом, в течение 7 суток - простерилизованных физическими методами (паровой, воздушный).
- 25. Проводят учет результатов исследования на стерильность.
- Глава 4. Бактериологический контроль эффективности обработки кожи операционного поля и рук персонала
- 26. Смывы с кожи операционного поля и рук хирургов производят стерильными марлевыми салфетками размером 5 х 5 см в физиологическом растворе. Марлевой салфеткой тщательно протирают ладони, околоногтевые и межпальцевые пространства обеих рук. После отбора проб марлевую салфетку помещают в широкогорлые пробирки или колбы с физиологическим раствором и стеклянными бусами, встряхивают в течение 10 минут. Жидкость засевают глубинным способом на 2 чашки Петри с мясопептонным агаром (по 0,5 см3) и в 2 пробирки с 0,5 %-ным сахарным бульоном (по 1 см3). Посевы инкубируют при температуре 37°С в течение 48 часов.
- 27. Проводят учет результатов.
- Раздел 3. Мероприятия, обеспечивающие асептические условия при посевах
- Глава 5. Требования к помещению для посева на стерильность
- 28. Контроль стерильности изделий проводят с соблюдением асептических условий, исключающих возможность вторичной контаминации изделий микроорганизмами.
- 29. В боксированном помещении поверхность пола, стен, потолка, мебели должна быть гладкой, без щелей, устойчивой к многократному действию моющих и дезинфицирующих средств. Полы должны быть нескользкими, иметь гидроизоляцию. Поверхность столов не должна иметь швов и трещин.
- 30. Боксы оборудуют приточно-вытяжной вентиляцией (с преобладанием притока над вытяжкой), устанавливают бактерицидные облучатели в соответствии с Приказом Министерства здравоохранения и социальной защиты Приднестровской Молдавской Республики от 10 сентября 2009 года № 476 «О введении в действие «Инструкции по применению бактерицидных ламп для обеззараживания воздуха и поверхностей в помещениях» (регистрационный № 5023 от 9 октября 2009 года) (САЗ 09-41).
- Глава 6. Подготовка бокса, инструментов и персонала к работе
- 31. Перед проведением работы поверхности в помещениях бокса и предбоксника (стены, пол, оборудование и прочие), а также внутренние поверхности бокса с ламинарным потоком воздуха обрабатывают дезинфицирующими средствами, разрешенными к применению на территории Приднестровской Молдавской Республики.
- 32. Через 60 минут после обработки в бокс вносят все необходимые для работы материалы и инструменты, кроме образцов изделий.
- 33. Перед началом работ бокс с ламинарным потоком воздуха включают на время, достаточное для обеспечения полного обмена воздуха, а затем помещают в него необходимый для работы материал.
- 34. В боксе и предбокснике перед работой включают бактерицидные облучатели.
- 35. Инструменты, посуду и спецодежду, используемые в работе, предварительно стерилизуют при следующем режиме: температура 132°С, время стерилизационной выдержки - 90 минут; изделия из резины (перчатки и другие) - при температуре 120°С в течение 60 минут.
- 36. Перед посевом исследуемый материал вносят в предбоксник, предварительно снимая наружную мягкую упаковку. В предбокснике пакеты, биксы протирают снаружи с помощью стерильного пинцета (корнцанга) стерильной салфеткой (ватным тампоном), обильно смоченной дезинфицирующими средствами, обладающими спороцидными свойствами, разрешенными к применению на территории Приднестровской Молдавской Республики, и оставляют на 30 минут. При поступлении изделий в мягкой упаковке первый слой снимают в предбокснике и изделия во внутренней упаковке сразу переносят в бокс.
- 37. Перед входом в бокс работники лаборатории тщательно моют руки теплой водой с мылом, вытирают их стерильным полотенцем (салфеткой), надевают в предбокснике бахилы, стерильные халаты, четырехслойные маски, шапочки и стерильные перчатки.
- 38. В процессе посева в боксе проверяют обсемененность воздуха. Для этого на рабочий стол ставят 2 (две) чашки с МПА, открывая их на 15 минут, затем чашки помещают в термостат при температуре 37°С на 48±2 часа. Допускается рост не более трех колоний не спорообразующих сапрофитов.
- Раздел 4. Контроль стерильности питательных сред
- 39. Для контроля стерильности питательные среды после изготовления и стерилизации помещают в термостат при температуре 37°С на 48±2 часа.
- 40. Бульон Сабуро контролируют полностью (всю приготовленную серию пробирок или колб).
- 41. Для тиогликолевой среды термостатируют 1 % от общего числа приготовленных пробирок или колб каждой серии. Для проведения исследований материала на стерильность эту часть сред не используют.
Реквизиты документа
Полное наименование
О введении в действие МУ МЗ ПМР 4.2.2942-14 «Методы санитарно-бактериологических исследований объектов окружающей среды, воздуха и контроля стерильности в лечебных организациях»
Издатель
Министерство здравоохранения
Вид акта
Приказ
№ документа
№ 394
Редакция
Первоначальный документ
Дата документа
21.08.2014
Источник оф. опубликования
САЗ 14-38
Скачать
Доступно по тарифу
К карточке документа
Карточка документа
О введении в действие МУ МЗ ПМР 4.2.2942-14 «Методы санитарно-бактериологических исследований объектов окружающей среды, воздуха и контроля стерильности в лечебных организациях»
Тип:
Приказ
Номер:
№ 394
Статус:
Опубликован
Редакция:
Первоначальный документ
Организация:
Министерство здравоохранения
Дата:
21.08.2014